中国水产门户网报道 因基枝藻为水生植物,其生长,繁殖均与水温密切相关,因此接种时间应选择在其繁殖季节,一般在春秋两季进行。最好是春季,因每年3~5月份是其繁殖高峰期,因各地气候条件不一,应以水温为基本参数,在水温为16~25℃的季节接种最为适宜。当水温低于16℃时,藻类细胞不易繁殖,而高于25℃,则藻体细胞易于腐烂死亡。
接种方法
1.自然繁殖接种法:取30g左右清洗干净的藻种,将龟甲已处理好的龟种连同藻种一同放养于水缸等容器中,并加入干净的培养用水,调节PH值为7.5~6.5之间,并将培养容器移至散射光较强的地方,让藻体的动孢子自然释放,并在龟甲上固着生长,一般经30天左右,龟背上会长满一层薄薄的绿色绒毛,表明接种成功。
2.人工接种法:将藻种用剪刀剪碎,再用木棒捣烂,用纱布将捣乱的种藻包起,拧滤出绿色汁体孢子液。孢子液中含有大量的孢子。每公斤孢子液中加VB1溶液0.5mL、VB121mL并加入含有适量营养盐的培养液、盛放于培养容器中,再放入已处理好的龟种。此法一般经25~30天,龟的体表会发现有绿毛,表明已接种成功。
3.培养基接种法:
(1)培养基的配制:准确称取去皮的马铃薯15g,淀粉20g,白糖5g,混均匀后放入烧杯内,加水至500mL,用火煮沸20分钟,过滤取滤液加入16g琼脂并加热熔化,冷却后即制成接种基枝藻的培养基。
(2)孢子液的制取:取500g藻种放于一盆清水中培养,约经10天左右,水即呈墨绿色,培养水温保持在20~24℃,用血球计数板放于显微镜下计算培养液中孢子的浓度,当孢子浓度大于每毫升100个时过滤培养液,然后将过滤的培养液放入离心机中离心5分钟转速每分钟1500转即可得到孢子浓缩液。
(3)接种:将培养基加热熔化,稍冷却后用毛笔蘸取培养基涂擦于擦干并处理好的龟背上,要涂得稀薄均匀,并趁龟背上的培养基尚未完全冷却,用干净的毛笔蘸取孢子浓缩液,均匀地涂在龟背的培养基上,凉干后,将龟种放入盛有清水的透明玻璃容器内,置于散射光明亮的地方,或用20~40W的日光灯照射日光灯距水面1m。
接种时应注意的问题:
(1)接种用容器大小要适宜,接种100g的龟种,以玻璃罐头瓶装较为合适,一个容器装一只,龟背要浸没于水中2~3cm,并用稀网布把瓶口包紧,以免龟爬出瓶外。
(2)在接种期间不能换水和喂食。因换水会换掉孢子、孢子的接种密度不够,而喂食后龟会排出粪便,导致基枝藻孢子的腐烂变质。
(3)保持安静:养接种龟的场所要尽量保持安静,使龟保持静伏状态,有助于龟甲上基枝藻的着生。
编辑:王宇
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