对虾病害的诊断及其防治

中国水产门户网报道1．病毒性疾病 

    1．1种类：对虾病毒病国内外报道有近20种，我国发现有7一8种。危害严重的种类是：

    1.1.1 WSSV （ Whiie Spot Syndrome Virus）白斑症病毒（又称中国对虾杆病毒（PCBV， Penaeus chinensis baculovirus）或皮下和造血组织坏死杆状病毒（HHNBV，Hypodermal and hematopoietic necrosis baculovirus）。病毒粒子一般为120 x 360nm，不形成包涵体。被感染的中国对虾离群不摄食，胃肠内空，元食物；头胸甲及腹甲易于被揭开而不连粘真皮，有的甲壳上有直径0.5一2mm的白斑；血淋巴稀薄不凝固，频死虾体色微红，色素加深。4一8cm的稚虾易被感染，3一10天内死亡率达80％以上，是近年来中国对虾等的一种爆发性流行病。

    1.1.2 BPV （Baculovirus penaei一type virus）对虾杆状病毒，杆状病毒科，A型杆状病毒亚群。病毒粒子55一75 x 3oonm，双股DNA，包涵体锥状，发现于桃红对虾等11种对虾的幼体，受感染的幼体在24一48小时内全部死亡，为一种典型的急性传染病，导致肝胰腺和上皮细胞坏死与损伤。

    1.1.3 BMNV （Baculoviral midgut glandnecrosis一type virus）中肠腺坏死杆状病毒，杆状病毒科，c型杆状病毒亚群。病毒粒于75 x 300nm，双股DNA，不形成包涵体，目前仅感染日本对虾的幼体，积累死亡率达98%，引起肝胰腺白浊，肝胰腺管上皮。中肠粘膜上皮坏死。

    1.1.4 IHHNV （Infectious hypodermal and hematopoietic necrosis virus）传染性皮下和造血组织坏死病毒，细小病毒科。病毒粒子直径约20nm，单股DNA，可在宿主细胞核内形成包涵体，被感染的兰对虾，在表皮上往往有白色或淡黄色的斑点，积累死亡卒 50一90％。

    l.1.5 HPV（ Hepatopancreatic parvolike virus）肝胰腺细小样病毒，细小病毒科，病毒粒子直径22一24nm，单股DNA，在宿主细胞核内形成包涵体，引起肝胰腺坏死和萎缩。在幼体阶段，发病后4一8周内，死亡卒5O－100％。

    1.1.6 MBV（penaeus monodon一type baculovirus）斑节对虾杆状病毒，杆状病毒科，A型杆状病毒亚群，病毒粒子75x 300nm，双股DNA，包涵体力大小不等的球形，急性感染损伤肝胰腺管和中肠上皮，除感染斑节对虾外，长毛对虾（P．penicillatus），墨吉对虾(P. merguiensis）等也可被感染，可使25日龄的幼虾死亡率高达100％。

   1.1.7 YHV（Yellow head virus）黄头病毒，弹状病毒科。病毒粒于44 x l73nm，单股RNA。主要宿主为斑节对虾。耙器官为鳃。触角腺。性腺、造血组织。淋巴器官等。病虾发病初期摄食量增加，随后食欲减退，不规则地浮游于水面；头胸甲呈浅黄色或发白，膨大，鳃棕色或变白。幼虾或稚虾（养殖50一70天），发病严重，死亡率达80一90％。

   1.1.8 TSV（Taura svndrome virus）托拉症病毒，小RNA病毒科。病毒粒子30一32nm，单股RNA。主要宿主为万氏对虾（Penaeus vannamei）。耙器官为甲壳下上皮(附肢、鳃、胃、食道、后肠）、结缔组织等。病虾不摄食，消化道内元食物；游泳无力，反应迟钝，甲壳变软，虾体发红，尤其是尾扇变红，幼虾（0.05一5g发病严重，死亡率高达80一95%，幸存者甲壳有黑斑。

    1.2诊断和检测技术

    1.2.l依据外观症状和行为。流行情况可作出初步诊断。

    1.2.2镜检：取病灶组织，制成压片，直接观察，如IHHNv；伊红染色，如BPV；孔雀绿染色，如MBV（也可用粪便），PV等；T一E染色法，如HHNBV，HPV等； Giemsa染色法，如HPV； Wright- Giemsa染色法，如YHV；暗视野显微镜观察，如BMNV；相差显微镜观察法，如YHV，等等。

    1.2.3常规病理组织学切片。 

    1.2.4电镜：超簿切片法；纯化负染技术。 

    1.2.5兔疫学方法：单抗ELISA；多抗ELISA；荧光抗体技术等。

    1.2.6 核酸技术：核酸探针点杂交；核酸探针原位杂交；PCR检测等。

    1.3防治方法：病毒性疾病是养殖对虾生产中危害极大的一类疾病，其潜伏期不易被发现，传播速度快，目前尚无有效方法治疗。因此，基本的控制措施是，实施全面健康养殖管理和进行综合预防。 

    1.3.1实行严格检疫，堵绝病原从亲虾或苗种带人。

    1.3.2养殖池塘要彻底清淤消毒。

    1.3.3使用不带病原和无污染的水源，并经过过滤和消毒，

    1.3.4受精卵在进入孵化池前进行消毒。 

    1.3.5投放高健康苗种，合理密养。

    1.3.6因地制宜养殖不同种类，缩短养殖周期，有的地区可进行轮养或休闲制。 

    1.3.7投喂优质配合饲料（含添加稳定VC，免疫制剂等），投喂鲜活饵料应经检测和消毒。 

    1.3.8配备增氧机，任何时候保证溶氧不低于5mg／L。

    1.3.9保持养殖虾池理化因子稳定，勿大排大灌换水，特别应保持有益藻相；高温期不为惊扰池虾。

    1.3.10不滥用药物，定期（10一15天）适时适量投放环境保护剂，或活性生物制剂。 1.3.11做好早晚巡池，发现异常采样检查和诊断。

    1.3.12 防止细菌。寄生虫等病害继发性感染，流行病季节或养殖中。晚期经检视和确诊后，及时泼洒消毒剂和投喂相应药饵。

    2．细菌性疾病

    2.1病原菌：养殖对虾的细菌病是一类很常见而且危害最大的疾病，根据报道已知 的病原菌有弧菌(vibrio)、气单胞菌(Aeromonas）、假单胞茵（Psendomonas）、屈挠杆茵（Flexibacter）、黄杆菌(Flavobacterium）、发光杆菌（Photobacterium）、那尔森氏菌(Yersiula）、螺菌（Spirillum）、亮发菌( Leucothrix）、发硫菌（Thiothrix）、分枝杆茵（Mvcobacterium）等10多个20多种。它们可分别引起多种疾病，在疾病的诊断中确定病原菌是十分重要的，一般细菌性疾病的确定可根据：（1）草兰氏染色；     (2）培养特殊；（3）生化特性；（4）血清学特性等。

    2.2常见疾病防治

    2.2.1 对虾幼体菌血症（ljlrval bacter lemia of penaeid shril11p）病原体：病原为副溶血弧菌（V. parahaemolyticus）和溶藻胶弧菌(V.alginolyticus)等，其次有假单胞菌（Psudomonas）和气单胞菌（Aeromonas）等，都是革兰氏阴性杆菌，具有极生单鞭毛，有运动力，其中有的细菌能发荧光。症状和病变：患病幼体活动力减退，游动缓慢，反应迟钝，趋光性减低，易沉于水底，体表或附肢上往往粘附一些固着类原生动物。单细胞藻类或其他污物。幼体一般停止摄食。在高借显微镜下能观察到病虾体内有细菌活动，濒死者内部组织及血淋巴中有大量细菌，肝胰腺细胞间有细菌。流行情况：此病流行于我国许多对虾苗种生产场，从蚤状幼体（Zoea）到糠虾幼体（mysis）、仔虾（postlarva）都可能被感染。发病期的最适水温为22一26℃，急性型死亡率达90％以上，甚至在2一3天内幼体全部死亡。 

    诊断方法：

    (1)根据症状及流行情况进行初步诊断。

    (2)用橡皮头吸管吸取具有上述明显症状，但尚未死亡的幼体于载玻片上，制成水封片，在高倍显微镜或油镜下观察，幼体的体内或附肢内的体液中有大量细菌活动，可作出诊断。

    (3)确诊应进行病原菌的分高培养和鉴定。

    防治方法：预防（1）育苗用水必须经过消毒、过滤，保持清洁；（2）孵化池、育苗池中使用EDTA（ethvlenediaminetetraacetic acid）10一50ppm；（3）幼体密度不宜过大，一般控制在每立方水体10一15万个幼体；（4）投喂优质的活饵料，例如单细胞藻类、轮虫、卤虫。 

    治疗（1）漂白粉（含有效氯25一32%）1 x 10-6，或漂粉精（含有效氯60一70%）0．5 x 10-6,24小时后换水，连续使用2一3 次。（2）呋喃纳斯或呋喃唑酮或呋喃西林1x10-6,24小时后换水，连续使用2一3 天。 （3）氯霉素1一10 x l0-6、或土霉素1-10 x l0-6、或红霉素0．5一1．3 x l0-6, 24小时后换水，连续使用2一3天。（4）福尔马林5一10 x 10-6, 24小时后换水，连续使用2～3天。
 
    2.2.2红肢病（红腿病）Red appendages disease 

    病原体：病原体力鳗弧菌（Vibrio anguillarum）和副溶血弧菌（Vibrio parahaemolyticus），有时也可分离到气单胞菌（Aeromonas）或假单胞菌（Psudomonas）中的种类。 

    症状和病变：主要症状是附肢（appendages）变红，特别是游泳足（pleopods）呈血红色，头胸甲（carapace）的鳃区呈黄色。病虾一般在池边缓慢游动，厌食。

    组织病理学（histopathology）观察：血淋 巴（haemo1ymph）稀薄，血细胞数量减少，凝 固慢或不凝固。游泳足等附肢变红是红色素 细胞扩张，鳃区变黄是鳃区甲壳内表面皮肤中黄色素细胞的扩张。鳃组织出现空泡；心肌 中有血细胞聚集成团包围细菌的炎症反应。

    流行情况：此病在中国许多对虾养殖场都曾发现过，常呈急性型，发病率和死亡率很高，有时达到90%以上，发病季节为7一9月，发病最适水温为25一30℃。本病的流行往往与池底不清洁，池水交换不良。放养密度过大，饲料质量低劣有关。

    诊断方法：根据游泳足变红和头胸甲鳃区变黄，可初步诊断；在环境条件恶化时，对虾的游泳足也暂时会变红，但条件改善后可立即恢复原状。进一步诊断应检查血淋巴，如果发现血淋已不凝固并有许多活动的杆状细菌，则基本可诊断。确诊应通过无菌操作，从濒死的对虾组织中或血淋巴中分离到弧菌。

    防治方法：除参照菌血病的防治方法外，在投喂的饲料中加入0.05一0.1%的氯霉素，或0．1一0．2％的上霉素。连续喂养 7一14天。Lewis和Lawrence曾提出用没有传染力的弧菌菌苗来对对虾进行免疫防治，以防止池养对虾的弧菌感染。

    2.2.3烂眼病（Eye一rot disease）

    病原体：据郑国兴， 1986报道为非01 群霍乱弧菌Vibrio cholera（non一01）。

    症状和病变：病虾行动呆滞，翘首，匍伏于池底或水草上，不时浮于水面作元方向的狂游，或漂浮于水面，以自身为轴作旋转翻滚。全身肌肉由元色透明逐渐变为白色不透明，眼球肿胀，由黑色变为褐色，进而溃烂，有的只剩下眼柄。病虾血淋巴液稀薄，凝固缓慢。病虾眼球在扫描电镜下观察，可以看到眼球表面布满细菌和杂物，小眼面问交接处，出现许多被细菌腐蚀而形成的孔洞和缝隙。眼球超薄切片在电镜下观察，也可看到组织内出现空洞，其间也有许多或单个弧状杆菌。

    流行情况：本病是我国河口低盐度养殖区的常见病，发生在6月至对虾收获期，尤以高温季节为多。病虾大多在）周内死亡，死亡率一般在10一30％，严重者高达80% 以上。非OI群霍乱弧菌广泛分布于水域和土壤中，也是虾池中的常在茵群，当环境优良，虾体健壮时，下会引起疾病；但当环境条件对该菌生长适宜时，它们便大量孽生繁殖，表现出致病性；在养殖密度过高，或投饲不当，引起水质恶化，溶氧不足，或温度、盐度等条件突然改变，以及虾体受伤，有寄生虫寄生时也可诱发得病，因此非OI群霍乱弧菌为条件致病菌。

    诊断方法：用肉眼观察眼球的症状可初步诊断，从眼球溃烂处取一点组织，做成水浸片，看到活动的细胞可进一步诊断；最后确诊，必须进行病原茵的分离和鉴定。

    防治方法：同红肢病。 

    2.2.4甲壳溃疡病（Shelly ulcer disease）又称褐斑病（Brown spot disease）

    病原体：病原为几种能产生细胞外脂酶。蛋白酶。甲壳酶的细菌，有弧菌、气单胞菌、螺菌和黄杆菌等属中的种类。

    症状和病变：病虾体表甲壳上和附肢上有黑褐色的斑点状渍疡。斑点的边缘较浅，稍白，中心部凹下，色深。病情轻者，渍疡未达到甲壳下层的组织；病情严重者，渍疡已达到甲壳下的组织中，甚至有些病虾的附肢，尾扇也烂断，断面也呈黑色。

    流行情况：褐斑病主要是在一些进行亲虾人工越冬的养殖场发生，这些养殖场由于捕捞、选择、搬运时操作不慎伤害了虾体，而引起细菌感染。通常在养殖过程中细菌性甲壳病的发病率是很低的。

    诊断方法：在对虾体表。附肢或鳃的外表层上，有褐色至黑色的斑点，斑点边缘苍白，中心凹陷。这些都是甲壳病的诊断依据。从伤口处取材，制成水浸片，在高倍镜下观察，能看到大量的活动杆菌，革兰氏染色阴性，即可确诊。

    防治方法：前面讨论的抗菌素，含氯消毒剂等化疗药物，同样适用于褐斑病。
    2.2.5丝状细菌病（Filamentous bacterial disease）

    病原体：病原体为毛霉亮发菌（Leucothrix mucor）。其次有硫丝菌（Thiothrix SP)、屈挠杆茵（Flexibacter sp）和噬纤维菌（Cytophaga sp）等。它们单独或同毛霉亮发菌一起附生在对虾幼体的体表、对虾成体的鳃。附肢等器官上。

    症状和病变：受严重侵害的虾体的鳃常常变色，黄色。绿色或褐色，这取决于丝状细菌吸附的碎片中藻类的颜色，以及鳃、附肢表面的外共生微生物的种类。在通常情况 下，毛霉亮发茵以及同这种病有关的丝状细菌，不会侵入对虾的皮下组织，也不构成明显的致病作用，主要是造成呼吸、摄食、行动和脱皮等的损害，导致生长缓慢、发育迟 缓，在鳃上附生时，往往因缺氧而导致幼体和成虾的死亡。

    流行情况：毛霉亮发菌等是河口和海洋环境中到处都有的微生物。它可以独立生 活，也可以在海洋动物或大型藻类的表面共生。因此，在对虾生活史的各个阶段，都可 能受到这些微生物的侵犯，但对健康的虾体，轻微的表面污损和鳃污损不会威胁健康。事实上在捕捞的野生对虾体上也常有发现。在许多对虾养殖场，特别是进行精养和半精养的一些虾场，由于放养密度大或有机质含量高，往往造成此病的流行，受害的虾体，在养殖全过程累计死亡率可高达60%以上。

    诊断方法：将幼体、后期幼体直接置于显微镜下检查，或自成虾的组织器官上（如附肢、鳃等）取下制成水浸片，在显微镜下观察，看到表皮或刚毛上附着大量丝状细菌，即可诊断。

    防治方法：（1）维持良好的水质，投喂优质饲料，促使对虾加快生长，顺利蜕皮，在一般情况下可自愈。(2)螫合铜（Cutrine一plus）商品名Aquatrine在流水中使Cu++达0.1 x 10-6,药浴24小时，在静水中，使cu++达到0.2 - 0.5 x l0-6，药浴2小时。 （3）氯化铜1 X 10-6 。（4）高锰酸钾2．5一5 x l0-6。药浴4小时。(5)氯胺丁5 x 10-6 。（6）福尔马林25 x 10-6，人长期药浴，或50一250 x 10-6，药浴4一8小时。（7）新霉素10 x 10-6,链霉素4 x l0-6，氯霉素1一10 x 10-6。

    2.2.6烂鳃病

    病原体：病原为弧菌属中的种类或其他杆菌，具体种类未查明。 

    症状和病变：鳃呈灰色，肿胀，质地变脆，然后从尖端向基部溃烂或脱落。病虾多浮游于水面，游动缓慢，反应迟钝，厌食，最后死亡，特别是在池水溶氧含量不足时，病虾容易死亡。 

    流行情况：烂鳃病多见于中国对虾（Penaeus chinensis），发病季节一般在8月份高温期，但发病卒比烂眼病低。

    诊断方法:用镊于取少许鳃组织，制成水浸片在低倍镜下观察可看到鳃丝溃烂的情况；换高倍镜观察可看到渍烂鳃丝内部有活动的细菌；确诊应进行病原菌的分高、鉴定。

    防治方法：同红肢病。

    2.2.7由立克次氏体（Rickettsiales）引起的疾病。
 
    2.2.8由枝原体（Mycop1asmataceae）引起的疾病。

    2.3细菌病的诊断和病原菌鉴定

据有关资料分析，在一些国家和地区，养殖对虾因各种疾病引起的死亡占50％以上，其中，细菌病占30%左右。因此，迅速。准确地进行诊断是能否有效地防治细菌性疾病的关键，特别是对发病急。死亡率高的疾病种类。养殖对虾细菌性疾病的诊断包括对罹病虾的症状。组织病理、疾病发生的环境条件以及对病原菌的分离、培养鉴定等以达到确诊。在对病原的确定方面，目前已有简便。灵敏。快速的方法。例如：（1）选择性培养基（Selective medium);(2)API-20E系统；(3)酶联免疫吸附法（ELISA）;(4)荧光抗技术（Fluorescent antibodytechnique）：(5)协同凝聚反应（Coagglutionationtest）；(6)聚合酶链式反应（PO1ymerase chainreaction）等可供应用。

    3．真菌性疾病

    3.1对虾幼体的链壶菌病

    病原体：链壶菌（Lagenidium）。高壶菌(Sirolpidium）等。

    症状和病变：受精卵透明度下降，发育停止，幼体活力减弱，体色不透明呈白浊，不摄食，不变态，下沉于水底。

    流行情况：无明显季节性，随不同宿主流行于受精卯孵化和幼体培育期。

    诊断：镜检,PYG培养基分离培养（胰蛋白质5g，酵母粉2.5g，葡萄糖1.0g，海水100ml，调整pH值至7．0。使用时每lml培养基中加青霉素500单位、链霉素500mg。） 防治：（1）对用水和受精卵进行消毒；（2）氟乐灵（Trefluralin）0.01-0.1x10-6;(3)亚甲蓝（Methylene b1ue）0.1 - 0.5 x 10-6；(4)孔雀绿（Malachite green）0.006 － 0.01 x l0-6。

    3．2镰刀菌病

    病原体：腐皮镰刀菌（Fusarium solani）、尖抱镰刀菌（F.oxysporum）、三线镰刀菌（F. tricinotum）、禾谷镰刀菌(F. graminearum)等。

    症状和病变：鳃、甲壳、和附肢、体壁、眼球坏死、变黑、碎裂、剥落。

    流行情况：日本对虾。越冬中国对虾等。

    诊断：镜检病原菌分离培养（豆蛋白胨10g、葡萄糖10g、琼脂14.5g、氯化钠20g、放线菌酮0.4g、氯霉素0.05g、蒸馏水1000ml，调整pH值为6.5±0.1）。

    4．原虫病害

    4．1微抱于虫病

    已知的病原体有微粒子虫（Nasema）、匹里虫（Pleistophora）和八孢虫（Agmasoma）属中的一些种。寄生于对虾的肌肉、性腺等组织器官，两广和海南省较为严重，除彻底清池和对放养苗种严格检疫外，目前尚无有效防治措施。

    4.2拟阿脑虫病 

    病原为蟹栖拟阿脑虫（Paranophrys carcini)。寄生于对虾的创伤处，井可从伤口入侵到血淋巴。心脏和鳃组织内。主要危害越冬亲虾。选留亲虾时谨慎操作，避免虾体受伤，亲虾人池前用淡水浸泡3一5min或用福尔马林300 x 10-6浸洗3min。

    4.3固着类纤毛虫和吸管虫病

    常见的病原种类有聚缩虫（Zoothamnium）、拟单缩虫（Pseudocarchesium）、累枝虫(Epistylis）、壳吸管虫（Acineta）和莲蓬虫(Ephe1ota)等属中的一些种类。固着于体表和鳃（受精卵和幼体也有固着）。严重时食欲减退。体质衰弱，窒息（鳃上大量固着时）而死。以(1)福尔马林30xl0-6; (2)高锰酸钾3一5 x l0-6；（3）碱性品绿0．3－0.5 x 10-6; (4)新结尔灭1x l0-6防治。

    5．其他病害

    5．1白黑斑病

    5．2自发性肌肉坏死

    5．3痉挛综合症

    5．4浮头和窒息

    5．5黄曲霉素中毒症。