如何做好史氏鲟人工授精繁殖

中国水产门户网报道    一、人工采卵授精
    (一)催产剂及注射方法
鲟鱼的人工繁殖采用类固醇激素类似物及绒毛膜促性腺激素作为催情药物。一般采用一次注射，也有采用二次或三次注射的情况。在产卵场捕获的雄性亲鲟，性腺成熟度情况都较好，不需要注射，轻压腹部就有精液流出，精液质量好。在显微镜下观察，精子大，游动能力强，时间长，鲟鱼的精子与其他鱼类精子相比个体大，寿命长，在无激活的情况下，4℃保存24小时不会影响受精质量。如果雄亲鲟压腹部无精液流出，则考虑进行一次注射。雌亲鲟的注射次数主要视其性腺发育的成熟程度而定，一般成熟度好，性腺已处于IV期末的，采用一次注射即可。若性腺成熟较差或成熟不够完善，最好采用二次或三次注射为宜，其原因是经过二次或三次注射后，卵巢从IV期过渡到V期时，不会造成生理反应过于激烈和生理机能失调。部分雌亲鲟，性腺发育处于Ⅲ期，若注射三次，也不会生产。这种鱼是处于不生产年，但有在产卵场出现的现象。雄鲟如需注射，其剂量一般为雌鲟注射剂量的1/15到1/10，雌鲟在催产中如有类固醇激素类似物，注射剂量为200～400微克/千克体重。史氏鲟的催产效应时间，即发效应时距通常比家鱼长一些，一般在30～50小时左右。但也有少部分雌鲟，因卵巢成熟度好，在进行催产时，卵巢已接近V期，所以注射适量催产药物之后，催产效应期很短，有的在24小时内(个别的甚至更短)即可发效排卵，并且催产率和受精率也都高。因此注重选择成熟度好的雌鲟，适时适量地进行催产注射是极为重要的。同时注意准确地掌握催产后鲟鱼卵粒的成熟变化过程及发效时间，适时进行采卵授精，避免因鱼卵过熟而降低受精率或鱼卵自产池底。检查卵粒成熟的情况，可通过挤压腹部视其有无成熟的卵粒流出，或根据腹部柔软程度加以判断。
    (二)采卵授精
在实际工作中，采集野生亲鱼进行人工催产时，往往存在着随机性和偶然性。有时雌鱼的卵已成熟自流，却找不到合适的雄鱼，没有成熟的精液可用，无法授精，为此除有计划地多储备些雄亲鱼外，还应采用离体保存法，在4～5℃条件下经常保存一定量精液备用。在雌鱼排卵前给雄鱼注射，可以每2～4小时采一次精液保存，受精时则有两手准备。
在准备掌握催产效应时间的基础上，适时采卵是非常关键的一步，采卵过早，卵没有完全成熟排出，采卵过迟易出现过熟，而无法受精，鲟鱼的生殖器官结构与硬骨鱼类有所不同，雌鲟卵粒成熟后，滤泡破裂，释卵于腹腔内，自然状态下，由于雌鲟鱼的生殖动作，成熟的卵会通过输卵管前段的喇叭口进入输卵管，再排出体外。喇叭口位于腹腔的中部，人工挤压法是很难将大部分成熟卵挤出的。根据具体情况，鲟鱼的采卵可有挤压法、杀鱼取卵法和活体取卵手术法三种选择。
   1.挤压法
适用于较小型的成熟度很高的亲鱼，雌鱼达到成熟排卵后，用手先从雌鱼腹后部向前推压，再由前向后推压，并重复这一动作。目的是体腔后部的游离卵粒尽可能地挤入喇叭口，最后经输卵管排出。这种方法很难把所有成熟卵挤出，总会有相当一部分挤不出来，但此法能有效地保留雌鱼。人工养殖的或低龄的亲鱼，最好采用这种方法采卵。
    2.杀鱼取卵法
主要用于野生的亲鱼采卵，目前在黑龙江边的产孵操作还主要采用这种方法。取卵前先切断雌鱼的鳃动脉或尾动脉放血，然后剖开腹腔取卵。这种方法虽可取出全部成熟卵，但亲鱼也同时被断送了。
    3.活体手术取卵
曲秋芝等(1997)用此法对史氏鲟亲鱼试验并获成功。亲鱼的性腺达到成熟后，将鱼腹面向上放在有头兜的担架上，用一根胶管通入口中供水，保证鳃部有清洁的水通过。在腹腔中后部，腹中线与腹骨板之间，开一个7～8厘米的口，将成熟分离的卵尽量取出，然后用尼龙线缝合切口。将鱼放回清洁的鱼池中。手术可以持续30～50分钟。虽不能全部取出成熟卵，手术也不可能百分之百成功，但大多数亲鱼会被保留下来，再次参加生殖活动。对于资源量已很少或是人工养成的成熟亲鱼来讲，这种方法是最合理的。
鲟鱼成熟卵的人工授精主要采用干导法，即先将卵置于盆中，每盆约4万～7万粒卵。加入1～2毫升精液，搅动精卵，使其混合。加入江水继续搅拌约5分钟之后，倒掉上面的体腔液和多余的精液，漂洗2～3次。这样授精工作即已完成，鲟鱼的精子大，而且激活后的寿命较长，因此也可以采用先加水激活精子，立即倒入盛卵盆中的授精方法。实验的结果说明，这种方法更能有效提高受精率。


    二、受精卵的脱粘处理
目前史氏鲟人工繁殖中的脱粘剂主要是滑石粉，材料即为市售的滑石粉，脱粘剂为20％的滑石粉悬浊液。脱粘时，在盆中注入清洁的孵化水，加入提前泡好的滑石粉液，慢慢搅动鱼卵，如果有卵粘连现象，用手拨开，每10分钟换一次洗液，弃去旧的溶液，加入新水和滑石粉。重复这项操作至卵完全不粘手为止，用孵化水冲洗至水清为止，放入孵化器中孵化，脱粘时间一般为30～50分钟。脱粘的具体操作方法有二种：
    (一)手工法
在脱粘过程中用手在脱粘容器中搅动卵，使之与脱粘剂不断充分接触，不发生粘连，直至卵不粘手为止。为不使温度变化过大，应将脱粘容器放在孵化水中。搅动时动作必须轻而缓，以卵能翻动与脱粘剂充分接触为度。
   (二)机械脱粘法
在机械脱粘法中，实际效果较好的是充气脱粘。充气脱粘的主要设备有气泵和锥形瓶。气泵的出气口通过管路与锥形瓶的下口相连，脱粘时将受精卵和脱粘剂倒入锥形瓶中，充分使瓶中的卵不断翻动(图1)。充气量的调整以卵和脱粘剂不在瓶底停留为度，脱粘达到要求的时间后，拔出充气管，放出鱼卵，冲洗后转入孵化器。
    三、受精卵的孵化
史氏鲟受精卵的孵化与其他养殖鱼类有所不同。鲟鱼的卵粒较大，沉性强，但孵化过程中又必须有一定的翻动。这就决定了它所使用的孵化方法和孵化器具有独立的特性。





                                            采集：邓洁