瓦氏黄颡鱼胚胎发育及幼苗发育的观察

中国水产门户网报道
　　瓦氏黄颡鱼 Pslteobagrus vacleii(Richerdson)，属于淡水温水性鱼类，地方名江黄颡鱼、硬角黄腊丁、江颡、朗丝（四川）、肥坨、黄姑子等。瓦氏黄颡鱼是黄颡鱼属中个体最大的一个品种，原栖息于长江水系干支流及与长江干流长期相通的湖泊、河流中，在长江干流流水中产卵孵化鱼苗。随着人们生活水平日益提高，对名优水产品的市场需求量日益增大，由于长江天然水体中成鱼过量捕捞上市及长江水体生态环境因素的影响，导致瓦氏黄颡鱼的资源严重下降，为了满足市场的需求量必须进行人工饲养，而人工饲养的苗种来源主要是人工繁殖。从1999年起湖北新兴水产研究开发有限公司就获得瓦氏黄颡鱼的人工繁殖成功，并进行大批量繁殖鱼苗用于推广饲养。瓦氏黄颡鱼的胚胎发育观察在国内外目前尚未见报道，本公司开展了对瓦氏黄颡鱼的胚胎发育观察与研究，为瓦氏黄颡鱼繁殖生物学的研究积累了相关资料。

　　1 材料与方法 

　　本实验的材料是采用人工催产、人工授精所取得的受精卵，直径测定的未受精卵取自于人工催产的未受精卵，直径测定的受精卵取自于授精吸水膨胀的卵。用解剖镜（6.3×5、4.5×5倍）进行胚胎发育观察。采用描绘器记录胚胎在发育中的外部特征及其变化，同时记录胚胎发育时序和测量性状。用同样方法观察幼苗的变化。每次所观察受精卵的数量不少于2个以上，幼苗则不少于10尾。

　　胚胎发育过程包括胚前与胚后发育，胚前发育分为受精卵、卵裂期、囊胚期、原肠期、神经期以及从尾芽到孵化期。胚后发育分为仔鱼前期、仔鱼后期和稚鱼期。前者从受精卵至出膜，后者从出膜至卵黄囊消失以及器官分化完善。

　　2 结果

　　2.1 胚胎时期（水温20.5～23.5℃）

　　2.1.1 受精卵 　成熟鱼卵呈近似圆球形，比重大于水为沉性，含丰富的卵黄，卵色浅油黄色，半透明。未吸水膨胀的卵经（从动物极至植物极端）的变化幅度为1.568～1.850mm，平均卵直径值1.67mm；短径变化幅度为1.520～1.673mm，平均卵直径值为1.610mm。受精卵吸水膨胀后，卵周隙扩大较为明显，其外膜柔软并富有弹性。动物极端的受精孔较明显，周围具有呈辐射纹排列，似由20～30条细丝组成，直到原肠初期逐渐消失。卵受精后遇水9～12分钟膨胀达到最大限度，此时卵的外径平均值为2.14mm，膨胀系数为0.28左右。未受精卵的吸水膨胀系数与受精卵基本相同。受精卵约在10分钟左右产生粘性，常粘附在其它异物体上，当脱落后，膜表面覆盖沙粒而形成保护色。整个卵膜表面均具有粘性，从受精卵至鱼苗出膜粘性无明显变化，鱼苗出膜后往往卵膜还粘附在异物上。
瓦氏黄颡鱼卵受精后28～30分钟，卵细胞的原生质向动物极集中形成胚盘，卵在内膜同向转动，使动物极一端始终朝上。由于原生质的运动，使胚盘形成明显的盘状结构。胚盘高度约为卵长径1/4.5左右。从受精卵至胚盘形成阶段时间为30分钟左右。

　　2.1.2 卵裂期 　瓦氏黄颡鱼是多黄卵，为不完全卵裂或盘状卵裂。在水温2.5～21.5℃时。受精后55分钟，胚盘中部下陷形成一沟状凹陷，出现第一次卵裂形成2个大小相似的分裂球。受精后89分钟，进行第二次分裂，与第一次分裂相垂直纵向分裂；形成相等的4个分裂球。受精后1小时48分，第三次分裂，形成8个形状相似的分裂球，细胞开始明显变小。受精后2小时4分，进行第四次纵裂，形成16个细胞。受精后2小时29分，出现第五次纵裂，形成32个细胞，受精后2小时57分，细胞开始进行不同步分裂，细胞排裂出现不太整齐。然后卵周质呈现有节律的凹凸收缩波浪滚动，一个收缩周期约需2分27秒，细胞在动物极成团分布而成圆形多个细胞。以后，细胞分裂仍继续进行，细胞变得较小，分裂沟模糊不清。

　　本阶段持续时间为2小时27分钟，在整个发育过程中，胚胎以动物极--植物极为中心轴，始终不停的转动。

　　2.1.3 囊胚期 　 在水温21.5～22℃时，受精后4小时51分，细胞因分裂，细胞体积减少，隆起为卵径的1/3，形成早期的囊胚即高囊胚。随后细胞团高度逐渐降低，并向卵黄扩展，胚盘呈扁平状，覆盖在卵黄上。受精后6小时58分，胚层向下扩展变薄，囊胚细胞围绕卵黄整囊表面形成合胞体，胚层高度下降至卵径的1/5，开始产生下包作用。从上部侧面透视可见囊胚腔，即囊胚晚期。

　　本阶段持续时间为4小时31分钟，胚胎的运动速度较为明显加快。

　　2.1.4 原肠期 　在水温20.5～22.0℃时，受精后9小时5分，胚胎细胞下包卵黄1/2时，边缘细胞层内卷增厚形成胚环，进入原肠早期。受精后12小时，当胚层下包至3/5时，胚环边缘细胞加厚隆起形成胚盾；较胚层下包至4/5时，胚盾伸长，胚体的中轴器官奠基已基本形成，胚盾达到动物极顶端，从而进入原肠晚期。本阶段持续时间为5小时2分钟。

　　2.1.5 神经胚期 　在水温21～22.5℃时，受精后14小时48分，胚盘细胞下包4/5时，胚盾上部中线处出现长形凹陷的神经沟，经120分钟后，神经管的前端分化出前、中、后3个脑泡，可见小胚孔或卵黄栓以及胚胎中部出现2对体节，胚盘下包5/6时，外露卵黄栓。出现5～6对体节。受精后19小时10分，胚孔封闭，脑泡两侧出现眼泡原基。此时出现6～8对体节。
本阶段持续时间为7小时10分钟。

　　2.1.6 从尾芽形成到孵化 　在水温21～23℃时，受精后20小时15分，开始出现器官分化，头部两侧眼泡原基发育为眼泡，胚盘未端尾芽雏形出现，但未脱离卵黄囊。胚体绕卵黄囊一周的2/3，有12对体节。受精后26小时10分，第三脑泡两侧出现听泡，胚体绕卵黄囊下包3/4。受精后27小时55分，尾芽明显可见，体节17～18对。受精后31小时15分，胚体头部外胚层加厚形成嗅板。体节21～24对。在听泡中可见两颗耳石，并有肌肉效应产生。受精后32小时50分钟，心脏分化并开始博动，66～69次/分钟，肌节28～30对。受精后40小时25分，在视泡的前外侧方形成第一对须原基，胚体扭动加剧，尾未端达到胚体头端。受精后43小时10分，在第一对须原基的后方，出现第二对须原基。受精后49小时50分，体节30～40对，胚体继续伸长，眼色素较多。胚体扭动强烈。尾摆动时明显超过头部，大多数仔鱼通过尾部破卵膜而出。
在水温20.5～23℃的环境条件下,瓦氏黄颡鱼从受精卵至孵化出膜整个阶段的时间为49小时50分钟，即为2.2天。

　　图１瓦氏黄颡鱼胚胎发育

　　1.受精卵(1.67mm)；2．胚盘形成；3.2细胞；4.4细胞；5.8细胞；6.16细胞；7.32细胞；
　　8.多细胞；9.桑椹期；10.囊胚初期；11.囊胚中期；12.囊胚晚期；13.原肠早期；14.原肠中期；15.原肠晚期；16.神经胚期；17.胚孔封闭期；18.体节出现；19.眼泡原期；20.肌肉效应期；21.心脏形成期；22.触须形成期；23.眼黑色素形成期；24.胚体出膜，

　　2.2 胚后发育（水温22～23.5℃）

　　2.2.1 仔鱼前期 

　初孵化出膜瓦氏黄颡鱼仔鱼卵黄囊较大，仔鱼全长4.87～5.35mm，体节41～42对，躯干部侧扁，透明带浅黄红，仔鱼呈仰卧状，尾部不停摇动，沉于孵化水体底部或附着于棕片隙中间（图25）。出膜后8小时，全长5.30～6.10mm，尾部的鳍褶上开始布细胞集而形成尾鳍条原基，体节43～45对，卵黄囊开始减少。出膜后16小时，仔鱼体两侧开始出现黑色素，且主要分布体背部，眼球基本布满黑色素变黑，全长5.80～5.95mm（图26）。出膜后38小时，仔鱼头部侧面开始形成4个平行的鳃板，卵黄囊有明显吸收变小，体表前部具有黑色素，全长6.15～6.48mm（图27）。出膜后48小时，下颌开始有微弱的活动，消化道与肛门基本上相通，呈直形管状，仔鱼在孵化器水体底部避光处集群堆积，仔鱼全长6.75～7.05mm。

　　2.2.2 仔鱼期 　出膜后3～4天，仔鱼开始群体顺孵化水体流向沿池壁游动，卵黄囊消失约2/3，消化道开始形成第一个弯曲，尾鳍和胸鳍的鳍条开始出现，全长8.30～8.50mm，开始转化外营养。出膜6～8天，上颌须达到胸鳍前缘，背鳍条、臀鳍条形成，鳔已明显充气呈白色发亮，全长11.50～13.00mm，出膜后9～10天，全长13.50～15.50mm，腹鳍条形成，胸鳍硬刺形成。此时仔鱼外部器官基本形成，全部摄食外营养，并向稚鱼过渡。

　　2.2.3 稚鱼期 出膜后10～12天，幼鱼全长20.10～22.30mm，身体两侧出现较平直的侧线，体形基本上近似成鱼。头部稍扁平，吻钝圆，口下位，上下颌具有许多绒毛状小齿，须4对，各鳍条完善，完全摄食外界营养，体色为灰黑色，此时幼鱼的形态特征基本定形。
图2 瓦氏黄颡鱼的幼苗发育

　　25.出膜期（4.87～5.35mm）；26.出膜后16小时（5.80～5.95mm）；27.出膜后38小时（6.15～6.48mm）； 28.出膜后3～4天（8.30～8.50mm）；29.出膜后6～7天（11.5～13.0mm）；30.出膜后7～9天（20.10～22.30mm）。

　　3 讨论 

　　3.1 瓦氏黄颡鱼成熟卵呈油黄色，近似圆球形，卵径1.67mm。卵经吸水9～12分钟达到最大膨胀度，形成宽为0.47mm的卵周隙。

　　3.2 受精卵属盘状卵裂，受精卵发育比鲤科鱼类要慢些，在水温20～23℃时，从受精卵至胚胎发育孵化出膜需要49小时50分钟，从孵化出膜的仔鱼到稚鱼期结束器官分化至完善过程约需要10～12天左右。

　　3.3 孵化过程中，鱼卵受精后约3小时左右要进行严格消毒1～2次，避免受精卵产生水霉病而引起死亡。

　　3.4 整个孵化过程在室内进行，防止紫外线杀死鱼卵。孵化用水不带有泥沙和污染物等物质。保持溶氧在5mg/L以上。

　　3.5 胚后发育至鱼苗开食时，最好投喂天然生物饵料。一般在出膜后第3天开始投喂，有利于提高鱼苗成活率与体质。　　　　

                                                                编辑：王宇