菜蓟提取复合物对罗非鱼生长和抗病机能的影响

    水产养殖业在过去十年中经­历了快速的发展，但也经­历了如环境污染加剧、疾病流行和水产品药物残留问题突出等诸多困难。化学合成药品或添加剂的效果通常比较显著，但其负面作用常常在其使用多年后被发现，人们一直试图寻找绿色安全的解决水产动物生长和抗病的饲料添加剂和药物。因此，近年来，纯植物（提取物）类添加剂或药品在水产养殖中的应用开始引起人们的关注，其安全性和有效性得到更多的认可。菜蓟为双子叶植物药菊科植物菜蓟的叶，有利胆和保肝作用，并有抗脂肪肝的功效，适量提取物加入日粮中可诱使胆Ö­更多生成生并分泌入肠道中，从而促进肠道对脂肪酸和脂溶性氨基酸的吸收，菜蓟提取物中的有效成分菜蓟素还有清除自由基的功效。

 

    BEDGEN 40®作为一种商业的菜蓟提取复合物，其有效成分包括菜蓟提取物（有效成分为菜蓟素等）和氯化胆碱等，其作为动物促生长和保肝的添加剂，已在畜禽添加剂领域的全球市场得到了广泛认可和应用，但关于菜蓟提取物或其商品在水产养殖上还没有任何的应用报道。本试验拟初步验证菜蓟提取复合物（BEDGEN 40®）对罗非鱼生长性能的影响，及用嗜水气单胞菌感染后的存活情况。

 

    材料和方法

 

    1.试验设计与日粮。试验分为4组（表1），组1为对照组，投喂基础日粮；组2～4是试验组，并分别饲喂含150、300和600 mg/kg 菜蓟提取复合物的日粮。（见表1）

 

    试验日粮等能（16.86 MJ/kg）和等氮（33.3% 粗蛋白），其近似营养成分见表2，添加剂的增减通过添加纤维素来进行平衡。各组饲料制成直径约2.4mm的颗粒饲料，室温下风干，置冰箱中保存备用。

    饲喂试验持续8周，饱食投喂，缸中剩余饲料在饲喂后约1h收集，置105℃烘箱中烘干并称重。（见表2） 

 

    2.试验鱼及养殖条件。试验前，罗非鱼投喂基础日粮暂养2周。然后将360尾体重接近的罗非鱼（18.0 ± 0.5 g）分成12组分别置于12只蓄水体积200L的玻璃缸中，每三个玻璃钢为一组。Ñ­环流水并保持在1.5 L/min左右，溶氧控制在 4-6 mg/L，试验期间平均水温25±1℃。

    3.样品采集及分析。1）生长性能检测：8周养殖试验结束，停饲24h后，每个玻璃钢的罗非鱼单独称重，进行取样检查和其它相关分析测定。所有的鱼被解剖然后每个蓄水池中的其中5条鱼的肝脏和内脏拿来称重来计算肝体指数(HSI) 和脏体指数(VSI)。鱼的背肌肉和肝脏被取样，然后密封在塑料袋中并冰冻保存（-18℃）直到做肌肉营养成分的分析。

    生长性能计算方法如下：

增重率(PWG，g) = 100 × (末重-初重) / 初重

特定生长率(SGR, %/d) = 100 × ln (末重/初重) / 试验天数

饵料系数(FCR, g:g) = 饲料消耗 (g, 干重) / 体增重 (g)

肝体指数(HSI, g:g) =100 × (肝脏重, g) / (总体重, g)

内脏指数(VSI, g:g) =100 × (内脏重, g) / (总体重, g)

肥满度(CF, g:cm3) = 100 × (体重; g) / (体长, cm) 3

    饲料、鱼肌肉样和粗蛋白、粗脂肪、水分和灰分，以及肝脏脂肪参照AOAC（1995）的方法所确定。

    2）肝脏抗氧化活性测定：4℃条件下，肝脏样品经­离心机（600×g）离心后，取上清液用于各指标测定。

    超氧化物歧化酶 (SOD) 活性参照Misra and Fridovich (1972)的方法测定，略有改动；过氧化氢酶(CAT)活性参照Aebi (1984)的方法测定；丙二醛的量参照Mertens et al. (1993)的定法来测量。

    3）嗜水气单胞菌攻毒试验：嗜水气单胞菌（BYK-038）毒株来源于上海海洋大学农业部渔业动植物病原­库，病原­菌按病原­库推荐培养方法在28°C条件下培养24h后，无菌生理盐水洗涤后，置离心机中1000×g条件下离心10min。去上清液，用无菌生理盐水调整细菌浓度至5×107 cfu。按0.15mL/尾的剂量注射到罗非鱼腹腔，其后连续14天记录其死亡率。

    4）统计分析：试验结果以平均值 ± 标准差表示。所有试验数据均通过SPSS11.5进行单因素方差分析，当有显著差异时，进行Duncan`s多重比较。

 

    结果

 

    1.对生长性能的影响：试验期间罗非鱼成活率很高，基本都在95%以上，各组间成活率无显著差异（P>0.05）（表3）。

 

    罗非鱼的生长指标如表3所示，试验组间罗非鱼增重率、特定生长率和蛋白效率都显著高于对照组（P<0.05），而饵料系数显著降低（P<0.05）。但各试验组之间的增重率和特定生长率无显著差异（P>0.05），而300和600mg/kg菜蓟提取复合物添加组的罗非鱼饵料系数还显著低于150mg/kg组。

    2.对形体指标的影响：各组间罗非鱼内脏指数间没有显著差异（P>0.05）；300和600mg/kg菜蓟提取复合物添加组的罗非鱼肝体指数显著低于对照组和150mg/kg菜蓟提取复合物添加组（P<0.05）。各试验组的肥满度较对照组均显著提高，且以600 mg/kg菜蓟提取复合物添加组最高（P<0.05）。（见表4）

 

    3.肌肉营养成分和肝脏脂肪含量的影响：各组间的罗非鱼肌肉水分、粗脂肪和灰分没有显著差异，但300和600mg/kg菜蓟提取复合物添加组的罗非鱼肌肉粗蛋白含量显著高于对照组（P<0.05）。补充菜蓟提取复合物后，罗非鱼肝脏脂肪含量显著降低，600 mg/kg菜蓟提取复合物添加组最低（P<0.05）。（见表5）

 

    4.抗氧化性机能：各组肝脏超氧化物歧化酶(SOD)、溶菌酶(LSZ)、过氧化氢酶(CAT)活性，丙二醛(MDA)生成量的检测结果见表6。（见表6）

 

    300和600mg/kg菜蓟提取复合物添加组的罗非鱼LSZ活性比对照组显著提高（P<0.05），而SOD、CAT活性和MDA生成量均比对照组显著降低（P<0.05）。

    5.嗜水气单胞菌的攻毒试验：嗜水气单胞菌攻毒14d内罗非鱼的成活率见图1。300和600mg/kg菜蓟提取复合物添加组的罗非鱼成活率比对照组和150mg/kg菜蓟提取复合物添加组显著提高（P<0.05）；150mg/kg菜蓟提取复合物添加组的罗非鱼成活率比对照组有提高，但不显著（P>0.05）。

 

 

    结论与分析

 

    菜蓟已经­被用在民间治疗肝病的医药上，且菜蓟提取物的几种成分已经­被证明具有保肝作用，且可促进肝再生。

    肥满度与BEDGEN 40®的补充呈正相关，表明罗非鱼因菜蓟提取复合物的补充而更加肥满，这从增重率指标中可以得到印证。肝体指数与BEDGEN 40®的补充呈负相关，即表明罗非鱼肝脏重量在鱼体重的比例中下降。

    MDA是脂肪酸过氧化代谢产物，被认为是肝脏损伤的指标，本实验中，对照组罗非鱼的MDA值较试验组鱼显著偏高，试验组随着采集提取物添加量的增加，MDA值有明显下降的趋势，显示了菜蓟提取物对罗非鱼肝脏的抗氧化能力增强。鱼体内有天然的抗氧化系统去除这些氧化产物，以维持正常的生理功能，其中包括CAT、SOD等抗氧化酶，试验组罗非鱼肝脏SOD、CAT活性较对照组罗非鱼显著降低，表明了试验组罗非鱼肝脏相对正常，体内的天然抗氧化系统没有过多的氧化产物需要清除。

在嗜水气单胞菌攻毒试验过后，BEDGEN 40® 的补充可以明显降低罗非鱼的死亡率。可以推测菜蓟提取物的补充有效的增强了罗非鱼的抗病机能，但具体的作用机制还有待进一步的研究证实。

    综上可知，在罗非鱼日粮中补充300-600mg/kg的菜蓟提取复合物（BEDGEN 40®）可有效促进生长、保护肝脏，改善形体指标，提高抗病机能。