鳗鱼赤鳍病症状及防治技术

1、病原体

嗜水气单胞菌（A.hydrophila），革兰氏阴性短杆菌，极端单鞭毛，没有芽孢和荚膜，刚从病鱼上分离的病原菌常两个相连。普通琼脂平板上的菌落圆形，边缘光滑，中央凸起，肉色、灰白色或略带淡桃红色，有光泽，发育很好；在MacConkey培养基和SS培养基上发育也很好。发育可能温度为5～40.5℃，28℃最适；pH6～11内均可生长，最适pH为7.2～7.4；在含盐0～4％范围内均可生长，最适盐度为0.5％左右，含盐4.5％不生长。氧化酶阳性，细胞色素氧化酶阳性，过氧化氢酶阳性，产生硫化氢，V.P.试验阳性，MR试验因菌株而不同，丁二醇脱氢酶阳性，产生吲哚，还原硝酸盐，尿素酶阴性，不利用丙二醇；发酵葡萄糖、甘露醇、麦芽糖、海藻糖、淀粉、糊精、肝糖、甘油、甘露糖产酸产气；不发酵木糖、山梨糖、菊糖、松三糖、阿东糖醇、半乳糖醇及肌醇；液化明胶，消化酪蛋白，消化莱弗尔氏血清，石蕊牛乳产酸、凝固、胨化；水解淀粉，磷酸酶阳性，脂肪酶阳性，卵磷脂酶阳性，利用柠檬酸盐，精氨酸脱氢酶阳性，鸟氨酸脱羧酶阳性，氰化钾试验阳性，p型溶血（马、羊红细胞），产生毒素。

2、流行情况

主要经过肠道感染；经多次用菌液浸浴不受伤及人工创伤的鳗鲡，均不感染发病，因此认为不易发生经皮、经鳃感染。带菌鳗鲡是主要传染源；嗜水气单胞菌为条件致病菌，能存在于富含有机物的水及底泥中。在养鳗池中广泛存在，当水质恶化，水温剧变，捕捞、搬运后鱼体受伤，或越冬后期鱼体抵抗力下降时，鳗鲡的肠壁上皮细胞发生退行性变化、脱落、崩解，这些崩解物成为细菌的很好营养，嗜水气单胞菌大量繁殖，因而容易暴发流行。鳗鲡、鲤、鲫等温水性淡水鱼都易感染；爬行动物的蛇、甲鱼及两栖类蛙也易感染；采用人工接种方法，哺乳动物的小白鼠、豚鼠、兔也有感染性。

3、症状及病理变化

躯干和头部的腹侧皮肤、臀鳍发红，胸鳍也常发红，随着病情的发展而出现出血点和出血斑；严重时全面明显发红，躯干背部和背鳍有时也发红，但有时濒死的鱼仍只有轻微发红；病鱼不吃食，靠近池壁静止不动，有的头部向上，无力地“竖游”，多数在几天内就死亡。腹腔壁常有点状出血；肝脏由于严重淤血而呈暗红色，有时也可看到出血斑；在肝门静脉周围，常可看到大范围的肝细胞发生脂肪变性，以至坏死；在血管周围常有大量淋巴样细胞；脾脏淤血、肿大；当体表出血严重时，鳃、肝、肾、脾的颜色变淡，病鱼严重贫血。肾脏的病变常较严重，肾小球毛细血管淤血、出血，肾小球上皮细胞剥离，肾小球崩解，肾小体囊腔内出现蛋白质样物质；肾小管上皮细胞发生混浊肿胀，滴状玻璃样变，以至坏死、崩解；间质中淤血严重。心肌纤维间严重出血。肠壁局部或全肠充血，失去弹性，肠内没有食物，而有黄色或乳白色带血的粘液状物，其中含有坏死脱落的肠上皮细胞和血细胞；在上皮细胞层和基膜之间，以及固有膜内有淋巴细胞和吞噬细胞等浸润，毛细血管充血，固有层出血，严重时肠粘膜皱襞的顶端坏死、崩解，以至全面崩解。病鱼贫血，红细胞数减少，红细胞比积降低，血液中水分增加，血糖、血清蛋白和血清钙量降低，红细胞沉降率增加。

4、诊断

鳗鱼的躯干、鳍等处发红、出血的疾病，除赤鳍病外，还有鳗爱德华氏病、鳗红点病及弧菌病等，且常几种病混合感染，因此仅从病鱼的外表症状不能作出正确诊断，必须进行细菌检查，常规分离、鉴定，费时太长，快速诊断可采用：

（1）直接荧光抗体法（FA）

①制备荧光抗体：用荧光色素标记家兔嗜水气单胞菌抗血清的球蛋白（注意抗血清必须是抗体效价高、无交叉反应，并经过提纯；荧光抗体制备后也必须进行处理，以消除其非特异性反应成分，并要进行测定，以确定其特异性染色强度及非特异性反应的有无；制备好后，加0.01％硫柳汞，-20℃可长期保存）。

②制备病鱼的病变组织压印片，干燥后，通过火焰3次固定。

③将荧光抗体滴加在压印片上，放密闭湿盒中，37C恒温30～60分钟，然后用pH7.2的磷酸盐缓冲液（PBS）轻轻地充分洗涤，冷风吹干。

④加1滴缓冲甘油，盖上盖玻片封片。

⑤在荧光显微镜下观察，如出现荧光，即可确诊患此病。

（2）间接荧光抗体法（1FA）

①制备家兔抗鱼血清荧光抗体：把鱼的血清注到家兔体内，制备家兔抗鱼血清抗体，并用荧光色素标记。

②在载玻片上，放一环嗜水气单胞菌菌液，让其自然铺开，冷风吹干，在火焰上通过3次固定，滴加病鱼血清，令其盖满标本，放密闭湿盒中，37℃恒温30分钟，然后用0.1mol／LpH8.0的PBS液轻轻冲洗3次.再按顺序浸泡于PBS液三缸中，每缸5分钟，取出再轻轻冲洗3次，冷风吹干。

③在上述载玻片上滴加家兔抗鱼血清荧光抗体，令其盖满标本，置密闭湿盒中，37℃恒温30分钟，如上法浸泡和洗涤，然后再用蒸馏水轻轻漂洗3次，冷风吹干，加l滴缓冲甘油液，盖上盖玻片封片。

④在荧光显微镜下观察，如出现荧光，即可确诊。

（3）琼脂凝胶扩散试验根据沉降线图形不同而进行鉴别。

（4）鉴别培养基

①Rimler—Shotts培养基（R—S培养基）：将分离材料接种在R—S培养基上，37C培养，20小时后观察，嗜水气单胞菌发育成纯黄色菌落。水中和鱼体上存在的细菌，形成同样菌落的，只有柠檬酸细菌属（Citrobacter）及变形杆菌的一部分。

②MccoyandPilcher（1974）设计了较简单的鉴别培养基：

细菌胨10g细菌肉精10g

肝糖4g氯化钠5g

十二烷硫酸钠0.1g溴麝香草酚蓝0.1g

琼脂15g蒸馏水1L

pH6.9～7.1

培养基加热溶解并稍冷，加入分离材料，混匀后倒人培养皿，冷却凝固后，表面再覆盖一薄层2％琼脂，25C培养1天，嗜水气单胞菌形成大的黄色菌落，杀鲑气单胞菌，形成点状的黄色菌落。

5、预防措施

（1）同赤皮病的预防方法。

（2）用下述治疗用内服药，连喂3天。

6、治疗方法

（1）外用药：任意选用下列一种：

①全池遍洒呋喃唑酮，使池水成（0.2～0.5）×10-6浓度。

②全池遍洒漂白粉浓度为（1～1.2）×10-6，或漂粉精浓度为（0.5～0.6）×10-6，或优氯净浓度为（0.5～0.6）×10-6，或三氯异氰尿酸浓度为0.4×10-6。

（2）内服药：任意选用1种：

①每100千克鱼每天投喂鱼泰8号药饲3kg，分上、下午两次投喂，连喂5～7天。
②每100千克鱼每天用呋喃唑酮1～3g拌饲分两次投喂，连喂7～10天。
⑧每100千克鱼每天用磺胺-6-甲氧嘧啶或磺胺-2，6-二甲氧嘧啶15～20g拌饲分两次投喂，连喂7～10天。
④每100千克鱼每天用氯霉素或四环素1.5～2.0g拌饲分两次投喂，连喂7～10天。

防治方法     
(1)每立方米水体用漂白粉1克，全池遍洒。
(2)每立方米水体用痢特灵0．3～0．5克，全池遍洒。
(3)每100千克鳗鱼用舒鳗1号药物10克拌饲投喂，每天投喂2次，连喂7天。