淡水养殖鱼类嗜水气单胞菌败血症(暴发性鱼病)是1989年以来在我国主要淡水鱼产区大面积流行的新鱼病。本课题组在“八五”科技攻关中,通过其病原、致病机理、免疫预防和诊断技术等的系统深入研究,全面完成了合同规定的各项技术经济指标,并取得了显著的经济、社会和环境效益。
(1)本成果进行了病原的分类鉴定,并证实其致病性。首次证实该病是由嗜水气单胞菌所引起的败血症;对该病原菌的溶血素(HEC毒素)、胞外蛋白酶、菌毛、S蛋白和血清型等进行了研究,确定了其理化、生物学和免疫学性质;阐明了嗜水气单胞菌是通过菌毛和S蛋白等粘附因子首先定居于肠道等靶器官,并进人体内繁殖,再通过所产生的HEC毒素及胞外蛋白酶致鱼死亡;查明该菌有2个O抗原血清型 (O9和O5)。
(2)首次研制出预防该病的嗜水气单胞菌灭活疫苗,并确定了简便有效的浸泡免疫法,提出了实验室制备鱼用疫苗的工艺流程和质量检验规程,建立于发酵罐大批量制备技术。共制备疫苗300万毫升以上,免疫期1年以上。从1993—1995在浙江、江苏等地的3万余亩面积的试验,平均成活率达80%以上,增加产值660万元以上。还在实验室研制出该菌的HEC毒素一多糖偶联疫苗。
(3)制备了多种嗜水气单胞菌抗血清和NEC毒素的单克隆抗体,建立了酶联免疫吸附法、点酶法和乳胶凝集法等,可用于快速检测该菌或其HEC毒素。并研制出诊断试剂盒,建立了用于检测该菌HEC基因的聚合酶链反应(PCR)技术。
(4)研究了该病的流行季节、地区分布、传染源和水质环境等因子。
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