台湾成功大学研究小分子RNA技术防治石斑病毒病

　　文/图 《养鱼世界》 郑石勤

　　台湾成功大学洪健睿教授发表口服型核醣核酸小分子片段(小分子RNA)新技术，能有效降低神经坏死病毒或虹彩病毒之力价，而且制造成本仅为疫苗的三分之一，防治海水鱼病毒性疾病有了一个新选项。

　　近年石斑鱼养殖常态性暴发病毒性疾病，如神经坏死病毒及虹彩病毒，已造成石斑鱼寸苗育成难度加大，育成率低下等，阻碍产业发展。

业者以鳗鱼浮料混合小分子RNA 添加剂饲养的青斑2寸苗，色泽亮丽

　　多年来，产官学界对防治石斑病毒性疾病的研究多偏向疫苗方向发展，并有相当的研发成果，然而不论是注射型、口服型或浸泡型的疫苗大多存在着成本过高的问题，导致大部分石斑养殖业者兴趣缺失。

　　如今，业者防治海水鱼病毒性疾病多了一个新选项，台湾成功大学生物科技研究所洪健睿教授发表口服型核醣核酸小分子片段(以下简称“小分子RNA”)新技术，能有效降低神经坏死病毒或虹彩病毒之力价，而且制造成本仅为疫苗的三分之一。小分子RNA已在民间石斑鱼寸苗场完成一次田间试养，成果令人满意。

成大洪健睿教授（中）与学生广文（左）、汉威（右）在中间育苗场合影

　　研究新技术，十年磨一剑

　　洪健睿进入国立成功大学生物科技研究所后，在2006年发表第一篇论文，探讨病毒对于养殖产业造成的重大损失，至今已有十年之久。由于研究疫苗的单位及学者专家甚多，洪健睿决定转向其他防治病毒复制的技术研究。他针对病毒性的问题，利用研发干扰病毒复制的小片段干扰性核醣核酸分子来阻断病毒之复制，历经十年的努力钻研，终于看到初步成果。古诗说十年磨一剑，洪健睿十年埋首钻研小分子RNA终获成果是最佳写照。

　　“小分子RNA是研发疫苗衍生出来的方法，针对病毒复制过程，去阻断病毒复制机制，进而达到增加稚鱼之存活率。”洪健睿说。神经坏死病毒(Nervous Necrosis virus，NNV)是石斑幼苗大量死亡主因，感染病鱼会突发性回旋打转，一旦发病，业者只能将其捞除淘汰，目前石斑鱼从卵到寸苗阶段的存活率不到0.3%，影响石斑鱼产业发展甚钜。

　　洪健睿教授指出，小分子RNA 并非疫苗，是属于以分子生物技术制造的一段核酸，在饲料管理法里可属于新型式之饲料添加物。口服型小分子RNA 具有专一性高、使用范围广、使用方便、快速发辉效果、具高度保护力以及价格合理等优点。“目前干扰病毒复制的小型干扰性核醣核酸分子已获得发明专利，目前正在寻找合适厂商洽谈非专属技术移转事宜，未来商品化后，希望能为增加稚鱼的存活率，提高石斑鱼产业竞争力。”

　　口服型的小分子RNA饲料添加剂应用范围很广，可以用在石斑种鱼、孵化场的6-7分苗、2寸苗、3-4寸，甚至成鱼场也可以用。大型鱼可用注射型注射，效果最佳。“用在石斑寸苗，可提高20%-30%的存活率。”洪健睿说。

　　现场试用见效果

　　新研发的小分子RNA饲料添加剂已在高雄某石斑鱼中间育成场试用，业者在2015年7月买进一批数万尾的青斑白身苗，依照洪健睿教授指示，在饲料中混合小分子RNA添加剂，第一次连续投喂一周，间隔3-4周后再连续投喂一周。

　　笔者采访时，该批青斑白身苗已经饲养42天，再过7天就要出鱼了。试用业者指出，从这批鱼苗的肤色黝黑发亮、游动时充满活力以及强烈的群聚行为来看，是做2寸苗多年以来最满意的一批，应该是小分子RNA发挥了一定的效果。“过去在天气热时大约45天出第一批苗(头鱼)，投喂小分子RNA饲料添加剂的青斑苗大约要49天，成长速度与以往培育的2寸苗比较并无差别。虽然还未出鱼，数量及活存率还不确定，估计应该不会太差。”

投喂小分子RNA 饲料添加剂的青斑苗，群聚性佳，活动力强

　　在20吨水的水泥硬池里，约1万尾的青斑苗群聚在一起，活动状态良好。业者表示，鱼苗集中是石斑鱼的天性，只有在喂饱以后，分布散一点，这批石斑鱼苗大半时间都群聚在一起，这是好现象。

　　业者指出，购买白身苗虽然都是透过中介买卖，但是通常会指定向自己觉得品质比较好的白身场购苗，品质好的白身苗才会购买，但是有时光凭外观不一定准确，运回来后偶尔会出状况，不见得每一批都顺利好养。

　　北高雄室外中间育苗场通常每批购进白身苗数量在数万尾，视白身苗场能供应的数量而定，如果养殖顺利，培育到2寸至2寸半，一般的育成率约在6成左右。根据业者统计，如果养殖情况正常，一批5万尾的鱼苗三个月养殖下来，总生产成本大约18万台币，其中丰年虾、蚊、梅虾、赤尾星、大肚鱼、工鱼等生物饵料成本大约要6万台币，加上人工饲料3万台币，所有饵料成本9万台币，占总成本51%。其它消毒药品、电费及人工也占约一半成本。该批5万尾2寸苗三个月养殖过程算起来，每尾生产成本要3.5台币。

　　石斑苗疫苗是一种科技财富，一尾鱼苗要卖多少钱才划算?最重要的是效果要看得出来，成本够低，业者才能接受。“2寸半青斑苗一尾卖15台币已经利润有限了，如果打疫苗要再加7-8台币的成本，业者根本无法接受。”

　　成大洪健睿教授指出，目前小分子RNA尚未商品化，未来确实售价还无法确定，但估计每条鱼苗的使用成本大约是疫苗的三分之一，实验时能提高30%-50%的存活率，对业者应该有很大的好处。