链球菌噬菌体被成功分离或控制罗非链球菌病

    2008年以来，整整7年时间，罗非鱼链球菌病一直困扰着罗非鱼养殖，可谓是“高温杀手”。直到现在，对于罗非鱼链球菌病也一直没有一个切实有效的治疗方案。


7月22日早上6点，《当代水产》记者从南京巨豹生物工程有限公司秦生巨老师处获悉喜讯：秦老师已经成功分离出链球菌噬菌体！


这就意味着，链球菌病“高温杀手”的“魔咒”即将被打破。以下是本刊记者第一时间连线秦生巨老师，关于这一重大发现的详细采访。


《当代水产》：我们都知道您一直在做蛭弧菌、噬菌体这方面的研究，但对链球菌噬菌体专项研究较少听闻，为什么会您会想到去做这方面的工作？这个分离实验做了多长时间才成功的？


秦生巨：虽然很多一线朋友反映目前水产养殖链球菌病很厉害，非常棘手，没有有效的防控措施。中科院珠江水产研究业内人士建议我是否从噬菌体生物防控方面做些工作。但我因为工作比较忙，一直没有时间去做这项工作。这次做链球菌噬菌体的分离，也是受一个契机的影响。


去年年初在海南开会，很多朋友跟我说，受到链球菌的影响，现在罗非鱼的养殖很令人恼火，好多塘都不敢养，用抗生素还好，如果不用抗生素，70%-80%都会死的，很厉害。但用了抗生素，药物就超标。所以他们也希望我能在这方面能够有什么方法解决这个问题。


我也实地走访了一些养殖户和养鱼的塘口，看出这个问题确实比较严重，所以我就下决心花点时间试一下链球菌噬菌体的分离工作。就这样才做出来的这个决定，前后花了1年多的时间。


要进行链球菌噬菌体分离工作，必须要有经过分离鉴定确认是水产品致病的菌种，在这方面得到了水科院珠江所的支持。


另外，要分离获得这一类噬菌体，只有在链球菌病害高发区的水体中才容易获得。所以要从广东、广西、海南等地的去采集样本，去做分离实验。到今天为止已经检测100多份水样，花了1年多时间，终于分离获得了链球菌噬菌体。噬菌体暂定名：HN48/SS130920，HN48/SS130920噬菌体在平板中形成的噬菌斑如下图。用于分离的宿主菌无乳链球菌SS130920菌种由水科院珠江所提供。




图为透亮空斑点为无乳链球菌HN/SS130920噬菌体噬菌斑

图为无乳链球菌SS130920对照无噬菌体噬菌形成


《当代水产》：这次成功分离出来的链球菌噬菌体是哪种链球菌？可以应对哪些水产品的链球菌病？

秦生巨：在医学上重要的链球菌主要有化脓性链球菌、草绿色链球菌、肺炎链球菌、无乳链球菌等。目前引起水生动物链球菌病的主要是无乳链球菌为主。无乳链球菌在鱼的、虾的、海豚等动物体内都有分离到，其中在罗非鱼身上的反应是很强的。所以我们分离获得HN48/SS130920无乳链球菌噬菌体对罗非鱼链球菌病的控制提供重要的科学依据和实际应用价值。


《当代水产》：一个典型的噬菌体的侵染细菌的过程，可以分为三个阶段：感染阶段、增殖阶段和成熟阶段。从实验结果上看，链球菌噬菌体感染链球菌细胞需要多长时间？


秦生巨：链球菌噬菌体侵染链球菌的细胞的时间很短，只需要几分钟就可以完成，环境合适30分钟就可以复制一次，比蛭弧菌感染宿主的过程要短得多，蛭弧菌一个感染过程是2-4个小时。所以一旦能够应用到生产实际中，效果将会很显著。


《当代水产》：噬菌体有利有弊，在吞噬链球菌细胞的同时，是否会对水体中其他有益菌细胞造成影响？


秦生巨：不会，绝对不会！噬菌体具有高度的特异性，是一对一的，一不可能对二。它是以特定的宿主菌细胞为靶标，只要侵染成功，它的作用是100%的。所以，链球菌噬菌体只会对链球菌起作用，不会对其他的菌细胞起作用。


《当代水产》：目前是处于实验阶段，预计投入生产需要多长时间？产品大概会在什么时间面市？在实际应用中如何使用？


秦生巨：小范围的试用试验会马上进行，但是真正要投入使用，还需要一些时间，至少要等到明年以后。


因为噬菌体是分离获得了，但它的相关生物学特性还要进行进一步研究。如果今年这些工作都能够完成，明年生产成产品，那就很不错了。


至于产品的使用方式，可以拌料，也可以泼洒到水体中。对于已经在体内感染的鱼，拌料可以从肠道中进行充分感染，这些产品从苗种就可以应用。


《当代水产》：我们都知道，现在链球菌病并没有根治的方法，只能尽可能减少损失。链球菌噬菌体的成功分离，对于罗非鱼链球菌病，是否能够起到根本性的根治作用？


秦生巨：说到根治，不能这样下结论，应该说是完全有可能控制罗非鱼链球菌病的发生和流行。因为要根治，涉及到一个使用方法的问题。还需要配合相关的水体条件，在所有方法、条件都满足，那就可以100%解决问题，也就是所谓的可以根治。


比如说，水温，在一定条件下，水温的高低影响到链球菌噬菌体的效果。因为我在做生长培育的时候，在研究实验中发现，链球菌噬菌体最适合的生长温度是35-37℃，这时它的生长繁殖速度是最快的，效果是最佳的。外环境温度再高，可能超过40℃甚至更高，但是水温一般很难超过30℃，不会超过35℃。


所以我现在担心的不是水温过高的问题，担心的是水温过低，如果水温低于20℃，它的效果会很差。