中国水产门户网报道由世界动物卫生组织发布有关锦鲤疱疹病毒感染症〈Koi herpesvirus〉之技术数据显示:
鲤鱼在许多国家是食用鱼类,观赏用的锦鲤﹝KOI﹞则是爱鱼成癖者喜爱之宠物及展示用鱼。锦鲤有些售价高达数万元,每年在全世界生产值达数十亿美元。但是1997年及1998年在德国、英国、挪威、以色列及美国等地出现鲤鱼〈Cyprinus carprio〉大量死亡,由赫德立克等人〈2000〉自池中成鱼之样本中,取出的病体分析,将其病毒分离出来,由其结构命名为锦鲤疱疹病毒〈Koi herpesvirus〉;因其主要是由DNA类疱疹滤过性病毒感染所引起,又名鲤鱼肾炎及鳃坏疽病毒,亚洲地区于2004年也被报导感染锦鲤疱疹病毒。
此疾病之感染区域通常为淡水中垂直感染。此病毒的最初来源并不清楚,但明显的,其传染途径是由病鱼直接感染。被感染后几乎百分之百大量死亡。尤其在水温13℃~23℃之间极为快速。第二种病菌〈如Flavobacterium columnare or Aeromonas spp.〉常与KHV一起感染鳃部。受其感染的鱼,涵盖各个成长阶段,如鱼花、幼鱼及成鱼的鲤鱼及锦鲤。
日本之研究发现,在2004年春天,野生的鲤鱼族群在水温>15~16°C时,大部分死鱼均为成鱼,显现成鱼比幼鱼易受感染。而病毒可生存于5 ~28°C,发病水温主要在17~28°C。
其它淡水鱼也会因感染而大量死亡,例如金鱼,草鲤,银鲤,及吴郭鱼,但是这种病菌在自然界未发现有感染的现象,可能是其疾病只限于特定种类。虽然仅有部分地区受到感染,但是却涵盖亚、欧、非等大陆之广泛地区。由于全球观赏鱼的贸易区甚广,真正被感染的范围,可能比已知的地区还要广泛。察知感染之情况如下:
1. 以临床目视病例
疾病产生的情况,可发现在寄生的组织及感染器官,如鳃组织、新鲜的肾、肝及脾脏中,亦可分离出病毒,显示其感染属于系统性的。
以细心目视方法观察可发现:
l 鳃和表皮有不规则之颜色出现。
l 鳃的坏疽现象严重。
l 鳃外表分叉且皮肤表皮出血。
l 眼睛偶有凹陷的现象及充血现象。
.使用显微镜观察感染器官及畸型的组织时,也可发现:
l 用光学显微镜观察其第二对之鳃耙有增殖及溶解之现象。在鳃丝表皮也有细胞核内含物,肝、脾、肾之表皮细胞亦有坏疽现象。
l 以电子显微镜观察细胞核内含物,有疱疹病毒之颗粒﹝在台湾及日本的例子,细胞核内含物则很少发现﹞。
目前有各种不同的诊断方法,但是大家一致同意的诊断过程,则尚未发展出来;目前也有几种方法在实验室中作测试,特别是KHV诊断法。但预期随着演进,其标准诊断疾病的方法会被建立。
2. 筛检测试是否受病毒感染
目前在鱼体展示时,无法由外观加以诊断是否属于临床之带原者。使用 病理组织培养法去筛检,或以细胞培养法分离病毒,也无法检测。只有以PCR检测带原者,去分离病毒是较可行的,且较易于建立警讯。
此时,推定的方法为:观察鲤鱼如果出现无方向性、古怪的游泳行为,体表颜色消失,以致大量死亡等。若已受KHV严重感染时,则会产生鳃坏疽。
3. 以映照法实验(screening methods)检验
因带原者主要是症状出现的时候才会被发觉。在2004年2月12-13日的伦敦的KOI疱疹感染国际研讨会上,建议在23-28℃,经过隔离养殖,至少两周﹝3-4周更佳﹞;接着用PCR检查,用来发觉带病原之鱼。此法应用在鱼体输出与输入,或者锦鲤展示前,可作为测试方法。
此病在自然共同栖地环境是具有高度传染性的。锦鲤可用来作为测定是否被感染,但因为锦鲤高贵,不适于作为昂贵的致死样本。但是可将锦鲤与普通鲤鱼一起放在一个观赏用桶子,再检测普通鲤鱼,看其是否被检测出KHV,而决定锦鲤是否受感染。
4.病毒隔离
为了病毒隔离,鳃的组织、新鲜的肾、脾等,由真正受到感染或垂死的动物体上取样。然而,应注意鳃组织若已被KHV感染变成坏疽,常会伴随二次细菌感染。(例如,Flavobacterium columnare or Aeromonas spp.)因此,要从有坏疽的鳃组织中隔离出病毒甚为困难。培养基中甚至要放入抗生素。因此取样以体内器官,特别是肾为佳。取这些垂死鱼体内的器官用KF-1(或一般鲤鱼脑CCCB)之细胞培养。自冰冻组织中无法取样,此法不适用于探测是否为带原者,即使在垂死或刚死的鱼中采样分离病毒,也可能失败(因细胞完全没有感染性)。
5.使用核酸检验
可用PCR检验新鲜或冰冻的鳃组织、肾或脾。以垂死及刚死鱼的样本为佳。此外病理组织结合现场,杂交种亦可用。
6免疫检验
以抗-KHV抗体诊断,可于表面观察,发现感染鱼体。
7.控制方法
与其它病毒感染一样,可能尚无处理方法。此外,疫苗之研究正在进行中,但还没有商业用之疫苗,可行的方法是隔离已有感染嫌疑的鱼。
针对已受感染及有感染嫌疑者,建议采取如下实际可行的控制方法:
● 限制鱼的移动或运输。
● 基于公共卫生的观点扑杀已受感染或有感染嫌疑者。
● 已受感染的池水要排放前使用氯(chlorine)消毒。
● 限制水进出鱼池。
● 隔离已有可能感染之带原者。
● 由于此病毒有高接触感染,早期发现是最佳的。实际上,应考虑到紧急捞捕之食用鱼是否适合人类消费。
下表为病毒在不同的物理-化学条件下之敏感度,不过仍须作进一步研究
对物理及化学反应之阻挠 |
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温度 |
感染性在35°C,2天后可被摧毁;而60°C,30分钟使病毒不活跃,惟仍须作更多研究, |
pH |
在pH<3或>11时摧毁感染 |
化学品 |
对氯仿(chloroform)敏感(另对其他脂肪溶剂及氧化物(oxidising agents),则须再研究确认) |
不感染状况 |
原则上,须作更多研究。不感染必须在OIE建议下实施 |
活存 |
病毒能在水中生存至少20小时,在含泥池水中可能更久,这也需要更多研究 |
南方渔网编辑:陈如燕
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