血卵涡鞭虫感染引起三疣梭子蟹死亡一例

　　天津南排河一口三疣梭子蟹和日本对虾混养池塘，水面20亩，水深1.5m，4月底投放虾苗、蟹苗，先后投喂卤虫、兰蛤、冰鲜鱼。8月15日左右开始拉网卖蟹，但拉不出来螃蟹，而池边有大量爬边死蟹。
      
　　8月17日到池塘现场查看（图1），水体淡绿色，镜检以硅藻为主，盐度22‰，下午17:30用简易测试盒测水质， pH值8.5，氨氮0.2mg/L， 亚硝酸盐0.05mg/L。池边大量爬边死的梭子蟹，还有大量梭子蟹在池边缓慢爬动（图2）。病蟹为十期梭子蟹（图3、4）,外观与正常蟹基本无差异，掂起来与同样大小的正常蟹相比明显要轻。
      
　　解剖见鳃部略呈黄色，肝胰腺萎缩严重，空肠空胃，肌肉萎缩、液化呈透明状，略显浅黄色，与正常蟹肌肉颜色差别不大（图5），剪断游泳足挤出淋巴液滴在载玻片上呈现乳白色。打开病蟹体腔时，可见液化状肌肉剧烈震动，鳃部压片可见大量纤毛虫、菌以及虫体（图6），肌肉压片以及步足淋巴液压片同样可见大量虫体（图7）。接种鳃、肝胰腺、步足肌肉、腿部肌肉进行细菌分离培养，取肌肉、鳃提取DNA做相关分子检测，取肝胰腺、鳃做病理组织切片观察。
       　　
　　结果：梭子蟹样品均分离出少量细菌（图8），但并无明显优势菌群；根据文献许文军（2007）设计的引物序列合成引物，进行PCR特异性扩增，得到约600bp的目的条带，回收后测序，与血卵涡鞭虫的序列相似性高达99%,图9中sample1为所采样品，sample2为对照；病理组织切片结果显示所取样品鳃丝外侧有纤毛虫，鳃小片内部有大量虫体（图10），肝胰腺腺管萎缩，有大量虫体充盈其中（图11），同样肌肉中虫体数量颇为可观，肌肉有液化、溶解、坏死现象（图12）。
      
　　分析：1、血卵涡鞭虫属植鞭动物门、腰鞭虫纲、Syndinida目、血卵涡鞭虫属，是海洋捕捞和海水养殖甲壳类的重要病原性寄生虫，主要寄生血腔、肝胰脏、肌肉等组织，造成甲壳类大量死亡。
      
　　2、本病例采集的样品镜检后能看到大量寄生原虫，发病梭子蟹的症状主要为肌肉液化，透明水样，步足关节膜处透明状，病理组织切片见肌肉纤维断裂、液化，并非资料中（许文军等，2006）描述的血卵涡鞭虫引起的肌肉浊白色牛奶状，步足关节膜处呈黄色或浊白色症状。而当地也发生一种养殖户称为“牙膏蟹”疾病，与资料中（许文军等，2006）描述症状相同，但初步诊断病原不是本病例中的血卵涡鞭虫，其具体病因还在进一步调查。
      
　　3、血卵涡鞭虫完整的生活史尚不清楚，确切的感染与传播途径可能因宿主和虫体种类不同而存在差异。一般认为通过水体和食物都能传播，健康蟹残食病蟹可能是重要的感染途径，对发病池塘中桡足类等浮游动物进行血卵涡鞭虫的PCR 检测,  也检出部分阳性结果，推测桡足类也可能是该寄生虫的中间宿主或直接宿主。据资料雌性个体的发病率高于雄性，在蜕壳、产卵和交配期尤其容易感染，而在盐度低于18的水体该病很少发生。
      
　　4、血卵涡鞭虫病没有有效的治疗方法，正确预防是控制该病的主要途径。选择体质健壮、无伤病、规格较大的种苗，经检疫和消毒后再放养，大量投喂鲜活饵料使水质、底质恶化也是血卵涡鞭虫容易感染的因素。发现疾病后，可及时采取措施控制病原的传播与扩散，病蟹应消毒深埋或销毁处理，以免进一步传染。（利洋技术部 杨慧英 南排河店 张杰 研究所 戚瑞荣提供 2013.06.27）