什么是 早期死亡综合症(EMS)/急性肝胰腺坏死综合症(AHPNS)?
Early Mortality Syndrome早期死亡综合症(EMS)最初的描述是在养成期投苗30天内出现不寻常的高死亡率症状。该定义较为广义,除了失败的管理造成高死亡率外,一些病原例如:WSSV(白斑病毒)、YHV(黄头病毒)和弧菌等也与EMS有关。因此,针对近期在亚洲爆发的对虾养殖新疾病,用EMS来定义可能导致概念混淆。
自2009年来,不明对虾早期死亡疾病席卷亚洲,造成了在投苗以后30天内大规模死亡的惨剧。已经证实被感染的种类包括南美白对虾和斑节对虾,病虾表现出肝胰腺苍白和萎缩,甲壳质地松软,生长缓慢,有时打转游泳,垂死的对虾沉入池底后死亡。组织学检验后发现了对虾呈现肝胰腺坏死,因此给予了这种疾病更为确切的定义,叫“Acute Hepatopancreas Necrosis Syndrome急性肝胰腺坏死综合症(AHPNS)”。
急性肝胰腺坏死综合症(AHPNS)的案例分析(参考Don Ligntner 教授的演讲)
这次疾病咨询会议,以未发现急性肝胰腺坏死综合症的致病因素(传染病原或毒素)而告终。美国亚历山大大学的著名对虾疾病专家Don Ligntner教授将急性肝胰腺坏死定义为原发性疾病。所谓原发性疾病,可以理解为不明原因的疾病。此外,急性肝胰腺坏死的病理还包括 1)肝胰腺B、F、R和E细胞功能障碍,肝胰腺从中部向四周坏死; 2)肝胰腺细胞核变大,细胞脱落后进入肝胰腺小管腔; 3)最后,血细胞发炎并伴随着弧菌的感染。 在池塘养殖过程中,大家通常使用肉眼观察来鉴定。对此,Ligntner教授也给出了以肉眼观察来诊断疾病的方法:1)病变的肝胰腺结缔组织色素缺失导致白化;2)肝胰腺显著萎缩;3)对虾甲壳质地松软,有时出现空肠现象;4)有时可以在肝胰腺中发现黑斑或黑条纹;5)用拇指和食指很难碾碎肝胰腺;6)严重的情况下,对虾可在投苗10天左右开始死亡;7)垂死状态的对虾可能沉入池底。
寻找致病原因 (参考Tim Flegel教授的演讲)
从AHPNS在亚洲,尤其是东南亚的扩散情况上看,导致AHPNS蔓延的很可能是一种病原生物。但是目前为止,从越南和中国收集的对虾样本的组织虑液在人工感染试验中无法证实该疾病是由病毒引起的。AHPNS的组织病理学显示该疾病症状很可能是中毒,但是在实验室条件下投喂越南提供的样本饲料和测试菊酯(甲壳动物杀虫剂)的实验得出的结论依然无法证实之前的假设。PCR测试结果显示,AHPNS与WSSV(白斑综合症病毒)、THV(黄头病毒)、IMNV(传染性肌肉坏死病毒)和TSV(桃拉综合症病毒)无关。
诸位专家演讲的个人浅析
针对在亚洲的突发对虾疾病,全球知名专家汇聚于曼谷,从不同的角度剖析了AHPNS。虽然最终的原因没有得到确立,但在会议上众多专家达成了诸多共识,同时国际最新的水产疾病分子检测技术也在会议上亮相。
1) 早在2012年初,Ligntner教授就在GAA杂志上发表了早期综合症病理研究报告。此次会议上,Ligntner教授的演讲内容与之前发表的病理报告大体相同。Ligntner教授描述了组织病理特征,首先确立了弧菌继发感染的观点,即弧菌感染是发生在对虾肝胰腺出现病变坏死之后。这个观点得到了专家的广泛认同。虽然病理学显示AHPNS很大程度上是一种生理中毒,但是实验测试了由越南提供的样品饲料和一种甲壳动物杀虫剂(菊酯),结果显示样品饲料和菊酯均不是造成AHPNS的罪魁祸首。
2) Tim Flegel 教授针对AHPNS与细菌或病毒有关的问题做了详细解释。通过PCR测试,已经排除了WSSV、YHV、IMNV和TSV造成AHPNS的可能性。在报告中,Flegel 教授对EMS和AHPNS这两个概念之间的差异进行了解释,并得到广泛认同。Flegel 教授指出了对虾样品收集和检测时常出现的误区并予以纠正,同时介绍了shotgun sequencing(鸟枪法测序)在对虾疾病检测上的应用。
3)对于新疾病的发生和扩散,生态学家Peter Walker教授认为主要原因是某些传染因素扰乱了生态系统。Walker教授以在中国发生的SARS和基孔肯雅热症为例子做了精彩的开场白,他认为在正常条件下,致病的病原是存在的但不致病;生态系统平衡被打乱了以后这些疾病才会感染健康的生物。对虾疾病的爆发,是因为对虾养殖在高密度非自然的水环境中,同时对虾常常受到来自外界的应激,鲜活生物交易运输则辅助了疾病的扩散。
4) 泰国Chalor Limsuwan 教授在他的演讲中强调了微生态制剂和AHPNS的关系,调查中指出,马来西亚和泰国发现EMS的池塘,100%为前期水质处理使用了微生态制剂;而在养殖全过程未使用微生态制剂的生物絮养殖模式池塘,没有发现EMS。这些微生物(乳酸菌、酵母菌)产生的酸性物质导致对虾脱壳异常,间接导致软壳和肌肉白浊。为了预防EMS,Chalor教授推荐养殖户购买PL10以上的种苗(PL10指post larvae期第10天),同时减少养殖前期使用微生态制剂调水,总碱度保持在100 mg/L以上,溶解氧保持在4 mg/L以上。
5)越南是AHPNS的重灾区之一,有人曾怀疑菊酯是造成AHPNS的凶手。菊酯的作用是消除养殖前期的白斑载体,在越南广泛使用。但有反例证明,一些使用了菊酯的池塘没有出现AHPNS,另外一些没有使用菊酯的池塘AHPNS问题严重; Ligntner教授则通过实验证实了菊酯与AHPNS无关。此外,藻毒素也曾被列入怀疑名单,但是没有证据证实藻毒素与AHPNS有直接关系。
相关知识:
NACA是Network of Aquaculture centers in Asia-pacific,亚太水产养殖中心。
NACA总部在泰国,是一个类似FAO的国际组织。
NACA有一个基地,东南亚的水产专家有些在那里做研究,同时向大众开设水产养殖专业知识课程。
NACA对中国水产行业的影响不是很大,很多人没有听说过,但如果要深入了解东南亚水产的前沿科技,就要会一点英语,去向NACA的专家们请教了。
感谢中国水产论坛网友“痞子天王”提供精准中文翻译。
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