由水科院黄海所环境室张旭志博士主持的“利用电化学检测与等温扩增技术相结合进行目标基因快速分析”研究取得重要进展,该研究由国家自然科学青年基金项目“环介导等温基因扩增(LAMP)过程的电化学信息研究”和黄海所基本科研业务费项目“恒温扩增自动基因检测技术开发与应用”共同资助完成。
该研究结合LAMP和电化学伏安检测技术,建立了一种目标基因甄别新方法。成功的LAMP反应把游离态的三磷酸2-脱氧鸟苷(dGTP,反应物之一)组装到链状产物DNA中去,结果引起该物质在碳纳米管阵列电极上氧化电流的显著下降。因此,这种伏安响应变化可以用来表征LAMP结果,进而指示出模板DNA中目标基因的信息。大肠埃希氏菌普通菌株中的malB基因作为实例得到验证:30分钟LAMP生化反应和约2分钟的微分脉冲伏安检测操作后,8.0阿克模板DNA中该基因的定性信息得到准确甄别,与传统的凝胶电泳法及荧光染料法所得结果完美一致。
该新方法具有操作简单、响应快、无需扩后分离处理和辅助试剂、费用低等明显优点,易于在环境监测、临床、检验检疫、转基因甄别等诸多领域推广应用。此外,该方法无需电极表面的DNA探针修饰步骤,检测仪器易实现小型化,便于携带,更适用于现场应用。
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